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山东高效液相色谱系统的固定相和分离条件的选择
发布时间:2018-08-24   点击次数:152次
山东高效液相色谱系统与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
 
山东高效液相色谱系统固定相:
1、载体:
(1)表面多孔型载体:由直径为30~40um的实心玻璃球和厚度为1~2um的多孔性外层组成。
(2)全多孔型载体:由硅胶和硅藻土等材料制成的直径为30~50um的多孔型颗粒。
(3)全多孔型微粒载体:由纳米级的硅胶微粒堆积而成,又称堆积硅珠。载体粒度为5~10um,由于颗粒小,所以柱效高,是目前使用广泛的一种载体。
2、固定液:
采用化学键合固定相。
3、柱填充技术:
(1)干法填充:适合直径大于20um的填料。
(2)湿法填充:高压匀浆填充。
 
山东高效液相色谱系统分离条件的选择
一、减小柱内展宽:
1、固定相:选用粒径小、分布均匀的球形固定相。化学键合相,匀浆法装柱。
2、流动相:选用低粘度的流动相,有利于增大组分在溶剂中的扩散系数,减少传质阻力。
3、流速:约1mL/min。
4、柱温:25℃左右。
二、减少柱外展宽:
1、柱前展宽:主要由进样引起,减小进样器的死体积。
2、柱后展宽:主要由接管、检测器流通池体积和检测器响应时间等引起。

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